琥珀酸是一种广泛用于食品、医药及化工产品重要的四碳二元羧酸。目前,琥珀酸主要采用化学法合成,容易造成环境污染,且其发展受到石化资源短缺的限制。可再生资源微生物发酵制备琥珀酸是一种最具发展潜力的绿色工艺模式,不仅摆脱了对石化原料的依赖,而且开辟了温室气体CO2利用的新途径。近年来,国内外学者对微生物发酵制备琥珀酸进行了大量的研究,卓有成效钝齿棒杆-数控滚圆机电动液压缩管机价格低张家港数控滚圆机多少钱。但是,仍然存在菌株代谢网络不完善、无法有效降低代谢副产物、琥珀酸生产强度低等问题。Corynebacterium crenatum是工业发酵制备谷氨酸的主要菌株,已有的研究发现,改变C.crenatum氨基酸发酵培养基溶氧水平,会对该菌株的代谢流分布产生较大的影响,厌氧发酵条件下,有相当部分碳流向琥珀酸发酵途径。本文基于Corynebacterium crenatum CICC20219厌氧发酵特性研究,以提高琥珀酸产量和生产强度为主要目标,本文由张家港弯管机网站采集网络www.wangaunjimuju.net通过对胞内碳代谢关键酶活测定,并结合代谢抑制分析,分析了C. crenatum在厌氧条件下的代谢网络,计算出琥珀酸形成的代谢通量分布；通过基因工程方法对其代谢网络进行针对性改造,有效降低代谢副产物的生成,提高了琥珀酸产量。研究并优化了琥珀酸厌氧发酵pH调控工艺,提高了生产强度。主要结论如下：(1)通过对比C. crenatum在有氧和厌氧两种条件下的代谢产物,并结合关键酶活测定,研究C. crenatum厌氧发酵产琥珀酸特性,分析其产酸的能力。将C. crenatum在厌氧条件下培养,发现C. crenatum细胞不增殖,但可以吸收利用葡萄糖产乳酸、琥珀酸等有机酸。C crenatum厌氧发酵22h内共产生了19.8g/L琥珀酸和46g/L乳酸,琥珀酸和乳酸的产量分别为0.27g/g和0.62g/g。将C. crenatum进行两阶段培养,发现在有氧阶段时,C.crenatum生物量迅速增加,而琥珀酸和乳酸的积累量很少,在通入二氧化碳转为厌氧发酵后,C.crenatum的生物量不再增加,而琥珀酸和乳酸的浓度开始迅速增加,分别达到了15g/L和51g/L。富集C. crenatum细胞进行高密度厌氧发酵时,乳酸和琥珀酸的生产强度与C. crenatum的生物量呈线性关系,生物量为60g/L时,乳酸和琥珀酸的积累浓度在2h内分别达到了59g/L和23g/L,生产强度分别达到了29.5g/(L·h)和11.5g/(L·h)。将C. crenatum进行循环厌氧发酵钝齿棒杆-数控滚圆机电动液压缩管机价格低张家港数控滚圆机多少钱本文由张家港弯管机网站采集网络www.wangaunjimuju.net